APOPTOSIS EN TRASPLANTE DE PULMÓN.
Influencia del lavado y la reperfusión del órgano

Dres. M. Boglione, M. Cadario, M. Siminovich, L. Galluzzo, E. Berensztein, D. Haag, C. Castaño, M. Barrenechea, J. C. Vasallo, M. Asprea, G. Williams, A. Fernández, D. Aguilar

INTRODUCCION
Objetivo: Determinar el rol de la irrigación con soluciones de preservación, la reperfusión y el rechazo en la apoptosis pulmonar en un escenario de trasplante pulmonar. Material y método: Veinticuatro cerdos Landrace con un peso de 15 a 30 kilogramos fueron usados como donantes y receptores en un modelo de trasplante pulmonar izquierdo con 5 días de sobrevida. Las muestras se obtuvieron en la siguiente secuencia: 1A: Donante, pulmón izquierdo, inmediatamente luego de la apertura del tórax. 1B: Donante, pulmón derecho, inmediatamente luego de la apertura del tórax. 1C: Receptor, pulmón izquierdo, inmediatamente luego de la apertura del tórax. 2A: Donante, pulmón izquierdo, inmediatamente luego de la irrigación del órgano. 2B: Donante, pulmón derecho, sin irrigar. 3A: Pulmón izquierdo implantado, 1 hora luego de reperfundido en el receptor. 3B: Pulmón derecho (nativo), 1 hora luego de reperfundido el pulmón donante en el receptor. 4A: Pulmón izquierdo, biopsia transbronquial a las 48 horas postrasplante. 4B: Pulmón derecho, biopsia transbronquial a las 48 horas postrasplante. 5A: Pulmón izquierdo, 5º día postrasplante (sacrificio). 5B: Pulmón derecho, 5º día postrasplante (sacrificio). Todos los pulmones fueron irrigados con solución de Euro-Collins fría (4Cº) durante la ablación. Seis receptores no recibieron inmunosupresión y otros 6 receptores recibieron 15 mg / kg / día de ciclosporina intravenosa. Los niveles plasmáticos de ciclosporina fueron dosados en tiempo 0 al 2º y al 5º día postrasplante. Cada muestra fue analizada por un observador ciego para determinar el grado de rechazo (A0 y A1 negativo, A2, A3 y A4 positivo), proliferación celular, y el índice de apoptosis en neumonocitos I y II empleando la técnica de TUNEL y Caspasa. Las pruebas de Chi cuadrado, prueba t de Student y Kruskal Wallis fueron utilizadas para el análisis estadístico. Se consideró significativo un valor de p menor a 0,05. Resultados: El grado de rechazo fue negativo en todas las muestras excepto en 4A (1 animal) y 5A (5 animales sin ciclosporina y 3 animales de los que recibieron ciclosporina) (p<0,05). La proliferación celular fue negativa en todas las muestras excepto 4A (1 animal 3%) y 5A (2 animales <1% y otro animal 1%). La media del índice de apoptosis en neumonocitos I y II expresado en porcentaje fue el siguiente: 1A: 4,88 y 10,59 respectivamente; 1B: 4,21 y 15,05; 1C: 5,97 y 14,32; 2A: 7,32 y 11; 2B: 5,47 y 9,10; 3A: 5,55 y 9,49; 3B: 4,76 y 8,32; 4A: 0,93 y 2,60; 4B: 6,97 y 15,62; 5A: 5,49 y 17,83; 5B: 2,13 y 6,89. No se observó diferencia comparando los animales tratados con y sin ciclosporina: 6,30 y 17,45 versus 4,52 y 18,28 respectivamente. Los valores séricos de ciclosporina fueron 623 ng (± 513) en el 2º día posoperatorio y 455 ng (± 179) en el 5º día posoperatorio. Conclusión: Si bien la diferencia estadística no fue significativa, se observó una tendencia que sugiere que la irrigación con solución de preservación fría y el rechazo incrementan la apoptosis en el pulmón trasplantado.

126 Medicina Infantil 2009; XVI Nº 2 [PDF]

Áreas de Trasplante de Pulmón y Cirugía Experimental.
Hospital de Pediatría Juan P. Garrahan