Tamizaje de infecciones por Virus Epstein Barr
en muestras de sangre mediante el uso de una PCR
en tiempo real previo a la cuantificación
de la carga viral

Bioqs. M. E. Venuta¹, E. Rosales¹, D. Viale¹, D. Borgnia¹, L. Irazu², M. Rodríguez², C. Hernández³

RESUMEN
El desorden linfoproliferativo postrasplante es una de las complicaciones más importantes producidas por el virus Epstein Barr (EBV) en pacientes trasplantados de órganos sólidos y de médula ósea ya que afecta la sobrevida del paciente y del injerto. En estos pacientes se han reportado altos niveles de carga viral en sangre periférica que preceden al desarrollo del desorden linfoproliferativo postrasplante. Por esto el monitoreo de la carga viral (CV) permite detectar pacientes en riesgo a desarrollar esta patología para iniciar una terapia preventiva. El objetivo de este trabajo fue desarrollar una técnica de PCR en tiempo real cualitativa (RT PCR) que permitiera ser utilizada como prueba de tamizaje previo a la determinación de CV EBV. De esta manera se podrían minimizar el costo que implicaría la utilización de un método cuantitativo comercial para todas las muestras que ingresaran al monitoreo viral. Teniendo en cuenta el desempeño de la RT PCR desarrollada, se estableció Ct ≤ 37 como valor límite para evitar amplificación inespecífica y seleccionar las muestras candidatas a la determinación de CV EBV. Dicho punto de corte presentó una sensibilidad diagnóstica relativa de 80%, una especificidad diagnóstica relativa de 85%, un valor predictivo positivo (VPP) de 53% y un valor predictivo negativo (VPN) de 95%. Para ello se consideró que valores de CV EBV< 4000 copias/ml sangre eran bajas o no presentaban riesgo de desarrollar complicaciones. El límite de detección LoD 95% fue de 280 copias de EBV/ml sangre (66 – 1184, IC 95%). Esta técnica demostró tener una buena performance analítica, ser de fácil implementación y el punto de corte seleccionado nos permitió realizar un buen tamizaje de muestras de pacientes trasplantados que resultaban ser candidatas a la determinación de CV, con la consiguiente disminución de costos.

11 Medicina Infantil 2015; XXII [PDF]

¹ Servicio de Microbiología. Hospital de Pediatría Dr. Juan P. Garrahan.
² Departamento de Parasitología. INEI-ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán.
³ Jefa del Servicio de Microbiología.
Hospital de Pediatría Juan P.Garrahan.